Does the mycotoxin ingestion by beef heifers on feedlot change the productive parameters?

In intensive beef cattle production systems, silage, corn, soy bean, and their coproducts are commonly used as feed. However, these ingredients are highly susceptible to contamination by fungi and mycotoxins, which may lead to immunological challenges and reduce animal production. The aim of the present study was to evaluate the effects of mycotoxin contamination of diet on intake, digestibility, and performance of heifers. Twenty non-pregnant (Nellore) heifers (age, >18 months; initial body weight, 348±30 kg) were used and randomly distributed in two treatments: (1) control (non-contaminated diet) and (2) zearalenone-contaminated diet (300 ppb). The diet comprised 70% corn silage and 30% concentrate. Individual dry matter intake and digestibility were estimated using external and internal markers. Heifer body weight was evaluated every week without fasting to calculate performance. The experimental design was completely randomized. Each animal was considered one experimental unit. Assumptions were tested for variance analyses (error normality, independence of errors, and homogeneity of variances) (p<0.05). There were no differences in dry matter intake (p=0.96) and digestibility (p=0.62). Performance (kg/day) did not vary as a function of zearalenone ingestion (p=0.68). Therefore, contamination of diet with 300 ppb zearalenone did not affect the intake, digestibility, and performance of feedlot-finished heifers.

Comparison of estradiol benzoate and cypionate in Girolando cows submitted to a timed artificial insemination / Comparação do benzoato e do cipionato de estradiol em vacas Girolando submetidas à Inseminação Artificial em Tempo Fixo

The various studies on the manipulation of the estrous cycle culminated in the development of estrous and ovulation synchronization protocols, to the point of defining an optimum moment for artificial insemination. The induction of ovulation is a primordial part for the determination of the moment of the TAI, so to study which hormones and how they behave allows a better understanding of this physiological process and, to manipulate it efficiently. The aim of the present study was to compare the use of estradiol benzoate (EB) and cypionate (ECP) as ovulation inducer in Girolando cows submitted to Timed Artificial Insemination (TAI). Ovulations of 108 Girolando cows were synchronized and the initial day of treatment, recorded as D0, which was when the animals received an intravaginal device containing 1g of progestogen and an intramuscular application (im) of 2mg of EB. After 8 days (D8), the device was removed and 500µg of cloprostenol (im) was administered to all females. Then, the animals were randomly divided into two treatments: BG Group (n = 52) and CG Group (n = 56). The CG animals received 1mg of ECP (im) as the ovulation inducer at the time of device removal, while BG Group cows received 1mg of EB (im) 24 h later (D9). TAI occurred at D10. After device removal, ultrasound evaluations were performed every 12 h up to ovulation. The following reproductive parameters were evaluated: interval from intravaginal device removal to ovulation - IDO (hours); interval from ovulation to TAI-IOT (hours); diameter of the largest follicle at intravaginal device removal (mm); maximum diameter of the DF (mm) at D10; the dominant follicle growth rate (mm/day); synchronization rate - SR (%); ovulation rate - OR (%) and PR - pregnancy rate (%). Only the ovulation rate presented a statistical difference (p<0.05). In conclusion, despite the ovulation rate difference, both estradiol esters administered were effective and presented similar pregnancy rates in Girolando cows submitted to TAI.

Os diversos estudos sobre manipulação do ciclo estral culminaram com o desenvolvimento de protocolos de sincronização do estro e da ovulação, a ponto de se definir um momento ótimo para a inseminação artificial. A indução da ovulação é parte primordial para a determinação do momento da IATF. Dessa forma, estudar quais hormônios e como eles se comportam permite compreender melhor esse processo fisiológico e, ainda, manipulá-lo de forma eficiente. O objetivo do presente estudo foi comparar o uso de benzoato de estradiol (BE) e cipionato (ECP) em vacas Girolando submetidas à inseminação artificial em tempo fixo (IATF). As ovulações de 108 vacas Girolando foram sincronizadas e no início do tratamento, D0, os animais receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progestágeno e uma aplicação intramuscular (im) de 2mg de BE. No D8, o dispositivo foi removido e 500µg de cloprostenol (im) foram administrados a todas as fêmeas. Depois disso, os animais foram divididos aleatoriamente em dois tratamentos: Grupo GB (n = 52) e Grupo GC (n = 56). Os animais do Grupo GC receberam 1mg de ECP (im) como indutor de ovulação no momento da retirada do dispositivo, enquanto as vacas do Grupo GB receberam 1mg de BE (im) 24 horas depois (D9). IATF ocorreu em D10. Após a remoção do dispositivo, as avaliações ultrassonográficas foram realizadas a cada 12 horas até a ovulação. Os parâmetros reprodutivos avaliados foram: intervalo entre a retirada do dispositivo intravaginal de P4 e a ovulação- IRD (horas); intervalo entre a ovulação e a IATF- IOI (horas); diâmetro do maior folículo na retirada do dispositivo intravaginal de P4 (mm); taxa de crescimento do FD-TCFD (mm/dia); taxa de sincronização - TS (%); taxa de ovulação- TO (%) e taxa de concepção - TC (%). Apenas a taxa de ovulação apresentou diferença estatística (p<0.05). Em conclusão, apesar da diferença na taxa de ovulação, ambos os ésteres de estradiol administrados foram eficazes e apresentaram taxas de prenhez semelhantes em vacas Girolando submetidas a IATF.

Influência do manejo na fisiologia reprodutiva do macho bovino / Influence of management on the reproductive physiology of male bovine / Influencia del manejo en la fisiología reproductiva del bovino macho

O conhecimento da fisiologia do desenvolvimento testicular e ponderal, a precocidade sexual, a capacidade de produção e qualidade espermática, além dos fatores que potencialmente interferem nestes processos, são importantes para predizer a capacidade reprodutiva dos touros. Entre esses fatores, existem alguns que podem influenciar negativamente na fisiologia reprodutiva do touro, e, dessa forma, reduzir a fertilidade desses animais e causar esterilidade, tais como os fatores diretamente relacionados ao manejo e a nutrição. Dessa forma, torna-se de fundamental importância o conhecimento da fisiologia do desenvolvimento testicular e ponderal, e de como alguns fatores, como o manejo e o clima, podem interferir nestes processos. Portanto, o objetivo desta revisão é demonstrar como alguns fatores do ambiente, tais como o manejo e o clima, podem influenciar nessas características, com vistas à produção animal.(AU)

Knowledge of the physiology and weight of the testicular development, sexual precocity, ability and quality of sperm production, and the factors that potentially interfere with these processes are important for predicting the reproductive capacity of bulls. Among these factors, there are some that can negatively influence their reproductive physiology, and thus reduce their fertility, causing sterility, such as factors directly related to the management and nutrition. Thus, it is of fundamental importance to study the physiology of testicular development and weight, and how certain factors, such as management and climate, can interfere with these processes. Therefore, the aim of this review is to show how some environmental factors, such as management and climate, can influence these characteristics, aiming to animal production.(AU)

El conocimiento de la fisiología del desarrollo testicular y ponderal, la precocidad sexual, la capacidad de producción y la calidad del esperma, además de los factores que potencialmente interfieren en estos procesos, son importantes para predecir la capacidad reproductiva de los toros. Entre estos factores, hay algunos que pueden influir negativamente en la fisiología reproductiva del toro, y por lo tanto reducir la fertilidad de esos animales y causar esterilidad, tales como los factores directamente relacionados al manejo y la nutrición. Por lo tanto, es de fundamental importancia el conocimiento de la fisiología del desarrollo testicular y ponderal, y cómo ciertos factores, como el manejo y el clima, pueden interferir en estos procesos. Así, el objetivo de esta revisión es demostrar cómo algunos factores ambientales, tales como manejo y el clima, pueden influenciar en esas características, con miras a la producción animal.(AU)

Maturação e desenvolvimento embrionário in vitro de oócitos bovinos após bloqueio da meiose com inibidores de MPF / In vitro maturation and embryo development of bovine oocytes after meiosis blockage with MPF inhibitors

O objetivo deste estudo foi avaliar a maturação e o desenvolvimento embrionário após a fecundação in vitro de oócitos bovinos que tiveram a maturação bloqueada com Butirolactona I e Roscovitina em meio de pré-maturação suplementado com soro fetal bovino (SFB). Oócitos foram divididos em 4 grupos: Controle 0 hora, Controle (maturação por 24 horas), Butirolactona I (bloqueio da maturação com 150μM de Butirolactona I por 24 horas, seguido de 24 horas de maturação) e Roscovitina (bloqueio da maturação com 50μM de Roscovitina por 24 horas, seguido de 24 horas de maturação). Para avaliar a maturação nuclear, os oócitos foram fixados e corados em aceto orceína. Parte dos oócitos dos grupos Controle 24 horas, Roscovitina e Butirolactona I após o período de maturação, foi fecundado in vitro. O desenvolvimento embrionário foi avaliado pelos índices de clivagem (D3) e formação de blastocistos (D7). Oócitos do grupo Butirolactona I apresentaram índices de Vesícula Germinativa após o bloqueio e de Metáfase 2 após a maturação semelhantes ao dos grupos Controle 0 hora e Controle, respectivamente. Por outro lado, a Roscovitina apresentou menores índices de Vesícula Germinativa e Metáfase 2. Os grupos Controle e Butirolactona I apresentaram maiores índices de clivagens. O grupo Controle apresentou maior produção de blastocistos que o Roscovitina e não diferiu do grupo Butirolactona I. Conclui-se que a Butiroloactona I pode ser utilizada no sistema de pré-maturação em meio contendo SFB, pois apresentou resultados semelhantes ao do grupo Controle o mesmo não ocorrendo com a Roscovitina, que apresentou menores índices de maturação oocitária e de desenvolvimento embrionário.

This study evaluated the bovine oocyte maturation and embryo development after in vitro fertilization. The maturation of the oocytes was blocked using Butyrolactone I and Roscovitine using pre-maturation medium supplemented with fetal calf serum (FCS). The ocytes were divided in four groups: Control 0 hour, Control (24 hours of maturation), Roscovitine (maturation blockage with 50mM Roscovitine during 24 hours followed by 24 hours of maturation), and Butyrolactone I (maturation blockage with 150mM Butyrolactone I during 24 hours followed by 24 hours of maturation). The oocytes were fixed and stained with aceto orcein to evaluate the nuclear maturation. After the maturation period, the remaining oocytes of the Control group, Roscovitine, and Butyrolactone I were fertilized in vitro. Embryo development was assessed by the cleavage rate (D3) and blastocysts formation (D7). The Butyrolactone I group had similar rates of germinal vesical stage oocytes during blockage, and Metaphase 2 after maturation, comparing to Control group at 0 hour and Control group, respectively. On the other hand, the Roscovitine group had lower rates of vesical stage oocytes during blockage, and Metaphase 2 after maturation comparing to Control groups. After in vitro fertilization, higher rates of cleavage were observed in Control and Butyrolactone I groups. For the blastocyst formation rate, the Control group showed better results than Roscovitine group. In summary, Butyrolactone I group had similar results to the Control group, and for this reason, is suitable for pre-maturation of bovine oocytes using FCS. In contrast, Roscovitine group had lower oocyte maturation and embryo development.

Criopreservação e desenvolvimento in vitro de embriões bovinos / Cryopreservation and in vitro survival of bovine embryos

O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção do crioprotetor, em duas ou três etapas, em embriões bovinos produzidos in vitro após a congelação em vapor de Nirtogênio. Blastocistos expandidos (1329) foram mantidos em co-cultivo (controle) ou criopreservados em 3 protocolos de congelação em vapor de nitrogênio. Os embriões foram equilibrados na solução de 10% de EG por 10 minutos e em 17%, 22% ou 28% de EG por 30 segundos. Após o envase, as palhetas foram mantidas em vapor de nitrogênio por 2 minutos e armazenadas em nitrogênio líquido. Após a descongelação, os crioprotetores foram diluídos em duas etapas, usando 0,3M de sacarose e solução isotônica ou em três etapas usando 0,3M de sacarose + 10% de EG; 0,3M de sacarose e solução isotônica. Os embriões foram co-cultivados com células da granulosa, avaliando as taxas de re-expansão após 24 horas e de eclosão após 24, 48, 72 e 96 horas. Para os grupos congelados no vapor e diluição do crioprotetor em duas etapas, as taxas de eclosão foram de 1,94; 11,88 e 6,06% para EG17, EG 22 e EG 28 respectivamente. Já para os grupos com diluição do crioprotetor em três etapas, as taxas de eclosão foram de 4,67; 9,90 e 10,78% para EG17, EG22 e EG28 respectivamente.

The aim of this study was to evaluate the dilution of cryoprotectant in 2 or steps of bovine in vitro-produced embryos after quick-freezing. A total of 1329 expanded blastocyst were kept in co-culture as control group or cryopreserved by 3 quick-freezing protocols. The embryos were exposed to 10% EG for 10 minutes then to 17%, 22% or 28% for 30 seconds. After loading, the straws were held in nitrogen vapor for 2 minutes and then plunged and stored in liquid nitrogen. After warming, cryoprotectants were diluted in two steps using 0.3 M sucrose and isotonic solution, or three steps using 0.3 M sucrose + 10% EG then 0.3 M sucrose and isotonic solution. Embryos were co-cultured on a granulosa cell monolayer and evaluated after 24 hours for re-expansion and at 24, 48, 72 and 96 hours of co-culture for hatching rates. The in vitro survival rates of embryos cryopreserved by the quick-freezing method and two-step cryoprotectant dilution were 1.94; 11.88 and 6.06%, for EG17, EG22 and EG28 groups, respectively. At the three step dilution, the in vitro survival rates were 4.67; 9.90 and 10.78% for EG17, EG22 and EG28 groups, respectively.

Capacitaçäo espermática in vitro com heparina e cálcio ionóforo e sua correlaçäo com a fertilidade em touros / Evaluation of in vitro sperm capacitation with heparin and calcium ionophore in bulls

O objetivo deste estudo foi avaliar os protocolos de capacitaçäo espermática in vitro com 100 mg/ml de heparina e 5 mM de cálcio ionóforo e correlacionar a capacitaçäo com a fertilidade in vivo. A capacitaçäo espermática foi avaliada pela coloraçäo com iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína e pela coloraçäo tripla com vermelho congo, vermelho neutro e giemsa. Os espermatozóides foram avaliados quanto a viabilidade (vivos ou mortos) e a qualidade do acrossomo (lesados ou íntegros), sendo caracterizados como capacitados (vivos e lesados), näo capacitados (vivos e íntegros) e mortos (lesados ou íntegros). A heparina apresentou 64,54 por cento e 39,16 por cento e o cálcio ionóforo 36,41 por cento e 18,11 por cento de espermatozóides capacitados, respectivamente, pela epifluorescência e coloraçäo tripla. Os touros foram divididos em três grupos de fertilidade, sendo o Grupo A <63 por cento, o Grupo B entre 63 e 68 por cento e o Grupo C >68 por cento. Nos três grupos houve diferença significativa (p<0,01) em relaçäo aos espermatozóides capacitados dos tratamentos com heparina e cálcio ionóforo, tanto na epifluorescência quanto na coloraçäo tripla. Näo houve diferença estatística significativa (p>0,01) para os espermatozóides capacitados, näo capacitados e mortos entre os grupos A, B e C, tanto na epifluorescência quanto na coloraçäo tripla para ambos capacitores (heparina e cálcio ionóforo). Näo houve correlaçäo entre os espermatozóides capacitados in vitro e a taxa de fertilidade a campo. A heparina apresentou melhor taxa de espermatozóides capacitados e a epifluorescência mostrou-se mais eficiente na detecçäo da capacitaçäo espermática (p<0,01)

Cryopreservation of mouse morulae through different methods: slow-freezing, vitrification and quick-freezing

The in vitro and in vivo development of mouse morulae after cryopreservation through different methods was examined. The slow-freezing involved an equilibration in 1.5M ethylene glycol (EG) and cooled at 0.5; 0.7; 1.0 or 1.2ºC/minute. The vitrification involved a 3 minutes equilibration in 20 percent EG and 60 seconds in solution containing 40 percent EG, 18 percent ficoll and 10.26 percent sucrose. The quick-freezing involved an equilibration in 3M EG + 0.3M sucrose for 5 minutes and 2 minutes in nitrogen vapor. In all three methods the straws were thawed in air for 10 seconds and in water at 25ºC for 20 seconds and the embryos cultured in vitro for 72 hours to estimate blastocyst rate. To assess viability in vivo, frozen morulae as well as fresh embryos were transferred into recipients. The in vitro development rates with 0.5, 0.7; 1.0 and 1.2ºC/minute were, respectively, 72.3; 79.6; 76.5 and 84.8 percent. There was no significant difference among the cooling rates of 0.7; 1.0 and 1.2ºC/minute (p > 0.01). The in vitro survival rates of vitrification and quick-freezing (84.5 and 74.3 percent, respectively) were similar to the slow-freezing. In vivo, the implantation rate and number of fetuses from embryos frozen through slow-freezing at 1.2ºC/minute, vitrification and quick-freezing were not significantly different

Co-cultivo de zigotos e embriöes de duas células de camundongos (Mus musculus domesticus) em suspensäo de células epiteliais de ovidutos de camundongos e bovinos nos meios CZB sem glicose, TCM199 e Ménézo B2(subscrito) / Zygotes and two cells mouse embryos in co-culture of mouse and bovine epithelial cells in CZB glucose free, TCM199 and Ménézo B2(subscribe) mediuns

Zigotos e embriöes de 2 células de camundongos F1 (C57/DBA) foram cultivados (controle) e co-cultivados em suspensöes de células epiteliais de ovidutos de camundongos (MOEC) e de bovinos (BOEC) até o estádio de blastocistos nos meios CZB, TCM199 e Ménézo B2(subscrito). Os zigotos que atingiram os estádios de blastocistos expandido e eclodido no CZB foram 44 (38,26 por cento) para o controle, 2 (1,89 por cento) para as MOEC e 8 (6,72 por cento) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatisticamente diferente (p(menor ou igual)0,05) em relaçäo às MOEC e às BOEC. Os zigotos cultivados e co-cultivados nos meios TCM199 e B2(subscrito) näo clivaram além de 2 células. Os embriöes de 2 células que desenvolveram até blastocistos no CZB foram 46 (43,80 por cento) para o controle, 45 (38,79 por cento) para as MOEC e 37 (29,60 por cento) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatisticamente diferente (p(menor ou igual)0,05) em relaçäo às BOEC. No TCM199, o total de blastocistos foi de 52 (48,15 por cento) para o controle, 68 (39,08 por cento) para as MOEC e 64 (48,49 por cento) para as BOEC, näo havendo diferença estatística (p>0,05) entre os três grupos. No B2(subscrito), o total de blastocistos foi de 28 (24,78 por cento) para o controle, 34 (28,10 por cento) para as MOEC e 25 (23,81 por cento) para as BOEC, näo havendo diferença estatística (p>0,05) entre os três grupos. Concluiu-se que o bloqueio dos zigotos nos meios TCM199 e B2 pode estar relacionado à presença da glicose e que o oviduto nao é espécie-específico quanto a sua capacidade em promover o desenvolvimento de embriöes de camundongos